人丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒操作基本步骤:
1、 试剂准备:所有试剂在使用前应平衡至室温,使用后请立即按照说明书要求保存试剂。实验操作中请使用一次性的吸头,避免交叉污染。
2、 加样:加样或加试剂时,*个孔与zui后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的 “预温育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。一次加样时间(包括标准品及所有样品)控制在10分钟内。*设置复孔进行实验。
3、 温育:为防止样品蒸发,实验时将加上盖或覆膜的酶标板置于湿盒内,以避免液体蒸发;洗板后应尽快进行下步操作,任何时侯都应避免酶标板处于干燥状态;同时应严格遵守给定的温育时间和温度。
4、 洗涤:洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上拍干,勿将滤纸直接放入反应孔中吸水,同时要消除板底残留的液体和手指印,避免影响zui后的酶标仪读数。
5、 试剂配制:Detection A及Detection B在使用前请手甩几下或少时离心处理,以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液请依据所需的量配制使用,并使用相应的稀释液配制,不能混淆。请精确 配制标准品及工作液,尽量不要微量配制(如吸取检测溶液A时,一次不要小于10 ),以避免由于不准确稀 释而造成浓度误差;请勿重复使用已稀释过的标准品、检测溶液A工作液、检测溶液B工作液。
6、 反应时间的控制:加入底物后请定时观察反应孔的颜色变化(比如,每隔10分钟),如颜色较深,请提前加入终止液终止反应,避免反应过强从而影响酶标仪光密度读数。
7、 底物:底物请避光保存,在储存和温育时避免强光直接照射。
人丙酮酸激酶(PK)ELISA试剂盒补充说明
2. 小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。请注意在吸取标本 / 标准品,酶结合物或底物时,*个孔与zui后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的 “预孵育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。而且,洗涤不充分将影响试验结果。
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