elisa检测试剂盒的常识

目前elisa试剂盒检测的样本中，除了细胞上清外，还有比较大的一部分是血清和血浆样本。对于ELISA试剂盒客户来说，在实验中可能用到不同的样本，如何辨别所购的ELISA试剂盒能否测手中的样本呢？对于zui常见的细胞上清，我们大家知道，培养细胞过程中，无特别情况一般是10%的牛血清加入培养基中，经过培养后，细胞的吸收消耗，zui后细胞上清中蛋白含量会很少，而且对于一般牛血清的来说，在过程中已经去除了，所以对一般ELISA而言，不会影响抗体抗原的结合。
如没有提供专门用于血清血浆样本的缓冲液，那么只要用已知浓度的待测指标蛋白加入所测种属的血清作为样本加样和用已知浓度的待测指标蛋白加入PBS缓冲液中同时检测对比，ELISA试剂盒即可知道该试剂盒是否可以直接用来测血清血浆样本。
如该种类型ELISA试剂盒样本总量如为100μl的话，一般而言，会是50μl的样本加样量和50μl的特定的缓冲液。
在使用试剂盒的过程，可将已知浓度的蛋白用血清或血浆调配到试剂盒标定的检测限的值的2倍，加入50μl做两孔，一孔补入常规的50μl标准品稀释液，ELISA试剂盒一孔补入50μl样本分析缓冲液，即可区分出效果来，有时候，有些为了达到“消除"的效果，在样本分析缓冲液中加入待测目标蛋白，为了鉴别出这种情况，也可直接加入样本分析缓冲液做一孔，同时做对比，这样可试出试剂盒中的针对血清血浆样本的缓冲液是否真的有效。
Elisa试剂盒的注意事项
1.试剂盒保存在2-8℃，使用前室温平衡20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶，这属于正常现象，水浴加热使结晶*溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中，密封(低温干燥)保存。
3.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
4.所有液体组分使用前充分摇匀。
按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水，包括用于洗涤的，应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。
试剂盒的配制：对于每种细胞因子应仔细阅读说明书，注意每批的细节。在使用细胞因子前，瞬时离心试剂瓶，尽可能多地收回其中的细胞因子。根据每批说明书中的细节，将冻干的细胞因子复溶。一般待测抗原标准曲线的线性范围的可通过将标准品做8次2倍系列稀释从2000pg/ml到15pg/ml。可利用标准的ELISA操作流程、放大试剂盒、第三类试剂、或改变酶底物系统可在一定范围内提高灵敏度。为了优化灵敏度，建议孵育标准品和标本。若使用过氧化物酶作为显色系统，应严禁在洗液和稀释液中加叠氮钠，叠氮钠可抑制过氧化物ELISA试剂盒酶的活性。
试剂盒的操作因固相载体的形成不同而有所差异，国内医学检验一般均用板式点。
ELISA试剂盒洗板方法：
手工洗板，吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸，酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内，浸泡1-2分钟，根据需要，重复此过程数次。
自动洗板，如果有自动洗板机，应在熟练使用后再用到正式实验过程中。
EPHA10    *蛋白激酶受体A10抗体                
EV71 polyprotein 3D    肠道病毒71型/手足口病病毒抗体                
ELF1    转录因子ELF1抗体                
Ephrin B3    *蛋白激酶B3抗体                
phospho-EphB1+EphB2 (Tyr594)    磷酸化*蛋白激酶受体B1+B2抗体           EphB1+EphB2+EphB3+EphB4    *蛋白激酶受体B1+B2+B3+B4抗体           EMX2    空通气孔样蛋白2抗体                
EN2    同源盒蛋白转录因子EN2抗体                
phospho-ERK5 (Thr218 + Tyr220)    磷酸化细胞外信号调节激酶5抗体           ENTPD2    CD39样蛋白1抗体                
EIF5    真核翻译起始因子5抗体                
EBF2    早期B淋巴细胞因子2抗体                
ELAVL2    ELAVL2蛋白抗体                
ELAVL2 + ELAVL4    ELAVL2+ELAVL4蛋白抗体