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小鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒 Mouse E-Selectin ELISA Kit ,规格:96T/48T,产品别名: 小鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)检测试剂盒
小鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒原理的简要说明书:E-Selectin, E选择素,选择素家族一员,是一种分子量107-115KDa的细胞表面糖蛋白。E选择素配体在中性粒细胞、单核细胞、部分记忆T细胞上表达。E选择素/E选择素配体在炎症时使中性粒细胞吸附至血管壁,并沿血管壁移动。此初始反应引起ICAM-1,VCAM-1更强烈的反应,zui终使炎症细胞进入血管外间质。
小鼠E选择素(E-Selectin/CD62E)ELISA试剂盒操作步骤
1、使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2、根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3、加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的*标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5、每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6、甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7、每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10分钟。避免光照。
8、取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9、在450nm波长处测定各孔的OD值。
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