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真核表达细胞常见表达载体有哪些

2022
07-02

22:00:02

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19
来源:赛尔瑞成(北京)生命科学技术有限公司
  真核表达细胞表达产物在分子结构、理化特性和生物学功能方面更接近于天然的高等生物蛋白质分子。
 
  原核基因表达调控与真核存在很多共同之处。但因原核生物没有细胞核,亚细胞结构及其基因组结构要比真核简单得多。
 
  1.原核基因转录调节特点
 
  ⑴σ因子识别特异启动序列,不同的σ因子决定特异基因的转录激活,决定mRNA,rRNA和tRNA基因的转录。
 
  ⑵除个别基因外,原核生物绝大多数基因按功能相关性成簇的串联、密集于染色体上,共同组成一个转录单位——操纵子。一个操纵子只含一个启动序列及数个可转录的编码基因。
 
  2.真核细胞结构及基因组结构远比原核复杂,其基因表达调控机制发生在染色体活化、基因转录激活、转录后加工、翻译及翻译后加工等水平的调节事件也要复杂的多。
 
  真核细胞常见表达载体:
 
  1.pCMVp-NEO-BAN载体
 
  特点:该真核细胞表达载体分子量为6600碱基对,主要由CMVp启动子、兔β-球蛋白基因内含子、聚腺嘌呤、氨*抗性基因和抗neo基因以及pBR322骨架构成,在大多数真核细胞内都能高水平稳定地表达外源目的基因。
 
  2.pEGFP,增强型绦色荧光蛋白表达载体
 
  特点:pEGFP表达载体中含有绿色荧光蛋白,在PCMV启动子驱动下,在真核细胞中高水平表达。载体骨架中的SV40origin使该载体在任何表达SV40T抗原的真核细胞内进行复制。
 
  3.pEGFT-Actin,增强型绿色荧光蛋白/人肌动蛋白表达载体
 
  特点:pEGFP-Actin表达载体中含有绿色荧光蛋白和人胞浆β-肌动蛋白基因,在PCMV启动子驱动下,在真核细胞中高水平表达。载体骨架中的SV40origin使该载体在任何表达SV40T抗原的真核细胞内进行复制。
 
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