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重组蛋白真核表达系统技术平台的特色

2022
07-02

22:00:02

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21
来源:化工仪器网
   重组蛋白作为生物制药在医学中作用显著,一般用转基因动物的乳腺产生。重组蛋白真核表达包括酵母表达系统、杆状病毒-昆虫细胞表达系统、腺病毒表达系统等。一般可以正确折叠,包含各种修改。但是价格高,周期长。
  重组蛋白真核表达系统技术平台的特色
  快速、highly-stringent筛选:只筛选到高表达稳定株;4~5个月获得稳定高表达细胞株(常规方法要9~12个月)
  高效表达:*启动子和*分泌信号肽,很容易达到30p/c/d/以上(传统方法需要用药物筛选9~11轮以上才能达到)
  稳定表达:表达质粒上的AGE稳定子,能够抑制染色体gene silencing,保障细胞株的长时间稳定表达
  用GS筛选:质粒上有*合成酶(GS)基因,可以做为备选筛选标记,也可以直接用MSX加压筛选,显著提高重组蛋白的表达产率;
  高产率:单克隆细胞株在普通摇瓶里的蛋白表达量已能达到1.5~2克/升
  工艺放大优化潜力:经工艺放大优化(Process Development)后,蛋白产量可提高5-10倍以上。本表达系统可容易达到3~5克/升的蛋白的产量。较大地节约生产成本。
  目前的表达系统各有利弊,但一般理想的表达系统满足以下几点:一是特异性,不受其他内源性因素影响,只能通过外源性无毒物激活。二是不干扰,不干扰细胞通路。以及诱导剂的诱导性、生物利用度、可塑性和剂量依赖性。
  因此,在选择表达系统时,必须充分考虑各种因素,如蛋白质性质、实验条件、生产成本、表达水平和安全性。权衡利弊后,选择相应的表达系统。
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