紫外可见分光光度计的应用

2022

05-30

08:50:06

 1503

来源：上海赛默生物科技发展有限公司

　　在一个波长，一个溶液的总吸光度是等于各个成分的吸光度的总和。根据这点就可分析混合物的各个组分。

　　如果有一种混合物，虽然是多组分，但组分吸收带不相重迭。在某波长一种组分的吸收很大，而其它组分在此波长则无吸收。这样就可在此波长采用上述的标准曲线法进行此组分的定量测定。

　　如果一个多组分混合物，其吸收带虽然相互重迭，但能遵守比耳定律，则可以采用解联立议程式的办法来进行定量。如混合物中含有n个已知组分，则需在n个适当的波长进行n次组分各自在n个波长的摩尔吸光系数。波长的选择应注意使一个组分的吸光系数比其它组分的吸光系数大，这样才能得到较高的度。

　　如果混合物中的几个组分吸收带相互重迭的并且不遵守比耳定律，便不能用解联立方程式的办法来解析。此时用分光光度法定量比较困难。Fry采用校正法把混合样品中的五个组分配成不同的溶液，得到一系列校正曲线。在校正曲线的基础上，解析得到了五组分的含量。但方法十分繁琐，使用不便。

　　如果混合物中含有未知吸收带的组分就更困难了。此时先用化学法分离纯化。但也可直接利用分光光度法来分析。Morton利用有杂质存在吸收光谱形状的改变计算混合物中含有杂质时*的量。虽然利用分光光度法可以作多组分分析，但方法比较繁琐。

　　近年来，很多分光光度计设有多组分分析附件。借助于微处理机来分析计算混合物中多种组分的含量，十分简便、迅速、准确。使得分光光度法在混合的定量分析中发挥更大的作用。同样，也可用后面介绍的导数光谱法来定量。

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