一般地说,根据样品的性质决定采用何种液相色谱方法,然后再选择不同类型的柱。即不同类型的柱则代表了不同的色谱方法。
不同种类色谱柱的差异在于柱结构、柱填料和柱尺寸的不同。
色谱柱 有不同的尺寸(长度和内径),分制备型、常规分析型和微型。不同类型柱的硬件也不同,(包括接头、柱管等方面),还有径向加压柱和夹套加热柱等。
不同液相色谱法的尺寸根据需要可以选取,普通分析3~30cm长,内径4~8mm。常用20cm长、4.6mm内径的柱。制备型柱内径一般为8mm、25cm长。微型柱内径l~3mm,长10~20cm。不同的填料分析的效果可能不同,这是因为生产过程不同所致。同一厂商生产的同种填料因批号不同也会有差异,这种差异可能从基质就开始(表面积、杂质、特殊处理),还有键合的化学物质(一氯或三氯硅烷反应剂),不同厂家生产的填料还会因**技术(预处理、键合过程、填装技术)等不同而呈现较大差异。由于种种差异、仅能假设同一批号的柱有基本相同的性质。
多数柱填料基质采用多孔硅胶微粒,通常有球形和无定形两种,具有不同的粒度、孔径和表面积。多孔聚合物微粒也适用于反相色谱。聚合物柱的流动相范围广,流动相pH值可在1至13之间。而硅胶基质pH仅能在2.5和7之间。显然,聚合物柱要好一些,但目前仍是以硅胶基质的柱为主。原则上,聚合物柱可以克服硅胶基质柱的某些不足,但需要大量的实验来证实,要进一步考查聚合物基质填料的全面优越性。
在实际工作中,选择性能良好的 色谱柱 可得到好的结果,首先要注意柱径、长度、填料种类和填料粒度。
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