反相高效液相色谱柱的保护要怎么做

2022

05-25

20:30:05

 381

来源：化工仪器网

　　反相高效液相色谱柱的填料常是以硅胶为基质，表面键合有极性相对较弱官能团的键合相。反向色谱所使用的流动相极性较强，通常为水、缓冲液与甲醇、乙腈等的混合物。样品流出色谱柱的顺序是极性较强的组分先被冲洗出，而极性弱的组分会在色谱柱上有更强的保留。

　　选择合适的色谱柱可以缩短方法开发时间，并使开发的方法更稳定。色谱柱的选择包括分离模式、色谱填料基质及基质物理化学性质等。

　　反相高效液相色谱柱的保护：

　　1、用预柱。（但要注意，若有时出峰异常，要先看看是不是它有问题了）

　　2、每次做完分析，都要进行冲洗，分析用流动相中若无酸、盐类物质，建议用90%甲醇冲洗30~60min；若分析用流动相中含以上物质，要先用10%甲醇冲洗1小时左右，再梯度走到90%甲醇冲洗30~60min。有必要时再循环几次，可以适当缩短时间。

　　若长时间不用该色谱柱，要冲洗好后，用纯甲酵或乙封存。

　　3、若流动相中用到离子对试剤，更应该好好冲洗，且该色谱柱作为，不能再做其它物质分析用。因色谱柱填料性质已与原来所不同，在该柱上所摸索的色谱条件，可能在其它同类柱子上得不到重现。

　　4、尽量避免反冲，除非该色谱柱明确说明允许。

　　5、普通C18柱尽量避免在40℃以上的温度下分析。

　　6、定期测柱效，有下降，可以用10%异丙醇甲醇冲洗色谱柱。若柱效还没有改善，可以再生，甲醇二氯甲烷一甲。

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