DNA快速脱保护剂仪器使用方案讨论

全自动寡核苷酸合成的脱保护步骤对合成时间和产品质量非常重要。为了提高合成速度、纯度和产率，我们经常使用如下几种快速脱保护试剂。
 
1. 用dC（ac）代替dC（bz） —— Beckman 认证方法
Acetyl-protected phosphoramidtes的特征：

• 超速脱保护（65℃时10 min）
• 寡核苷酸合成中是关键成分
• 工业标准
• 使用AMA方法时不变化
• 纯度与操作非常相关
• 在认证的ISO 9001质量系统下操作

 2. TAC试剂
在温和条件下，用含TAC保护基代替标准保护基可使脱保护反应加速（在温和条件下），适用于含有base-labile单体的寡核苷酸。
 
TAC的特征：

• TAC基团的脱保护速度很快，在有浓氨条件下，55℃ 15min或在室温中2 h。
• 与AMA脱保护试剂兼容（AMA是一个混合物，含有大于25%的氨溶液和40%的jia胺）
• 在乙腈中易溶。不需要加入混合溶剂，如二甲基甲酰胺或二氯甲烷。
• 适用于含有活泼基的低聚体合成，如燃料和修饰物。
• DNA合成中不变化是必要的条件，除快速脱保护试剂Cap A代替Cap A。
• 应用dA(tac)可以提高寡核苷酸的质量.

3. dG（dmf）方法
改变二甲基jia胺（dmf）dG的保护基可以加速合成高纯度、高产率的寡核苷酸。因此也提高了高通量的产量。
 
dG的特征

• dG（dmf）脱保护的速度比传统dG（ib）快，在浓氨中脱保护的时间是55℃ 2 h，65℃ 1 h。
• dG (dmf)-单体适用于G多的序列；与传统的dG（ib）比较，未脱保护率被*地降低了。
• dG (dmf)-amidite在溶液中与dA（bz）、dC（bz）、dT一样稳定。
• dG（dmf）amidite可以直接替代dG (ib)-amidite
• 在DNA合成中没有改变是必须的条件，除有低浓度的iocline oxidizer，如0.02 Miocline， 存在。

4. 替代dC保护基
改变TAC  dC的保护基可以加速合成高纯度、高产率的寡核苷酸。用dC (tac)代替dC (bz)可以加快AMA脱保护的速度，提供高通量寡核苷酸的合成。
 
dC的特征

• 用AMA脱保护可以加速，*脱保护需要10 min，在65℃条件下。
• C-单体的副反应通过转氨作用被消除。
• 对一些修饰过的核苷酸都可用。
• dC (tac)-amidite可以直接替代dC (bz)-amidite。
• 用乙腈溶解amidite， DNA合成不改变。在标准醋酐的capping试剂中可以用。

DNA快速脱保护基反应器是为有效制备生物样品而设计的，用于PCR引物、探针和组分生产，DNA测序、DNA和RNA合成、随机启动、载体设计、DNA指纹和人工基因合成。是DNA/RNA/寡核苷酸脱保护基快捷稳定的解决方案。反应可直接在96位样品架上进行，如“深井”板。6-10个样品架可用于10升压力反应器。因此，操作工作量大大缩短。样品被填充不同的板，例如带有过滤底座、特殊盖等，通过设计的电动升降系统，在反应中和反应后自动移出压力容器进行干燥。在开启和关闭过程中，会抽走腐蚀性反应气体，确保实验室人员的*安全。与样品的反应发生在气相的压力和微波效应下。高气相浓度会在几分钟内引起*均匀的反应。在系统中，所有操作参数均一直根据程序条件进行控制，并以图形方式记录和存储以进行质量控制。在整个过程中，液体试剂以及气相中的压力和温度是被控制的。这确保了样品的完整、可重复和均匀反应，以便随后分离出选择性DNA序列。*的10升反应器容量为*的样品吞吐量提供了新的可能性。

DNA快速脱保护基反应器应用：

食品工业

研究机构

大学

分子生物学

遗传学

合成生物学

医学

寡核苷酸脱保护基微波高压反应器特点：

反应器容量：10升容量

样品数量：6至10个，每个样品有96位。

温度范围:*200°C

功率输出：1200瓦

符合CE标志

保修12个月

电源：220 V至240 V/50/60 Hz

*功耗：2500瓦

显示屏：彩色触摸屏

尺寸:W x D x H 52 x 73 x 123厘米（无终端）

重量：180公斤