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《粮油检验 谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定》行业标准征求意见

2023-03-22 08:30:48来源:仪表网 阅读量:97 评论

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导读:本文件规定了时间分辨荧光免疫层析法测定谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的原理、试剂及材料、仪器及设备、样品制备、样品测定、结果表述和重复性。

  【仪表网 行业标准】近日,由国家粮食和物资储备局组织起草的《粮油检验 谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的测定 时间分辨荧光免疫层析法》行业标准已形成征求意见稿,现向社会公开征求意见,截止日期为2023年5月17日,意见反馈邮箱tc270sc1@ags.ac.cn。
 
  脱氧雪腐镰刀菌烯醇(Deoxynivalenol,DON),又名呕吐毒素,主要是由镰刀菌属的禾谷镰刀菌、黄色镰刀菌等菌株产生的次级代谢产物,主要污染小麦、玉米、大麦等,具有很强的毒性。2003 年我国对小麦、玉米、稻谷中 DON 的污染情况调查显示,小麦、玉米 DON 污染较稻谷严重。我国早在 2005 年颁布了粮食和食品中 DON 的限量标准,2017 年颁布了《国家食品安全标准 食品中真菌毒素限量》规定小麦、玉米中 DON 的最高限量为 1000 µg/kg。
 
  本标准旨在建立谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的时间分辨荧光免疫层析检测技术,用于谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的快速检测,便于基层粮库、粮油企业以及粮食监管部门对谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的污染情况进行掌握和防控,实现对谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的有效监管,保障我国粮食质量安全和人民群众的身体健康。
 
  本文件按照 GB/T 1.1-2020《标准化工作导则 第 1 部分:标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。参考GB 5491 粮食、油料检验 扦样、分样法;GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法;GB/T 27404 实验室质量控制规范 食品理化检测等文件内容编制。
 
  本文件规定了时间分辨荧光免疫层析法测定谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的原理、试剂及材料、仪器及设备、样品制备、样品测定、结果表述和重复性。本文件适用于小麦、玉米等谷物中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的快速定量检测。
 
  原理:
 
  试样中脱氧雪腐镰刀菌烯醇与含铕-螯合物的聚苯乙烯微球标记的特异性抗体发生结合后,抑制了层析过程中抗体与硝酸纤维膜检测线上脱氧雪腐镰刀菌烯醇-BSA偶联物的免疫反应,使检测线上荧光强度降低,通过荧光强度变化和荧光分析仪的内置标准曲线,自动计算出试样中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的含量。
 
  仪器及设备:
 
  1.粉碎机:电机转速 ≥ 1000 r/min。
 
  2.分样筛:1 mm 孔径。
 
  3.天平:分度值 0.01 g。
 
  4.离心机:≥转速 4000 r/min。
 
  5.振荡器:转速 ≥ 2500 r/min。
 
  6.计时器。
 
  7.时间分辨荧光分析仪:在激发波长为 365 nm ± 5 nm,检测波长为 615 nm ± 5 nm 条件下测定。
 
  样品测定:
 
  1.将检测卡(5.1)从冷藏状态(2 ℃~8 ℃)取出,室温平衡15min。
 
  2.仪器校准:选取测试项目为脱氧雪腐镰刀菌烯醇,准确移取 100 µL 脱氧雪腐镰刀菌烯醇标准溶液(5.3)通过样品稀释液稀释 10 倍后,加到检测卡加样小孔中,室温孵育 10 min 后,将其放入时间分辨荧光分析仪(6.7)中,点击仪器主界面“测量”菜单中“标准测量”按钮,然后按“是”按钮进行校准。
 
  3.样品检测:准确移取 100 µL 待测溶液(7.3),加到检测卡加样小孔中,室温孵育 10 min 后,将其放入时间分辨荧光分析仪(6.7)中,点击仪器主界面“测量”菜单进行测量,即可读取样品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的含量。
 
  结果表述:
 
  试样中脱氧雪腐镰刀菌烯醇含量由时间分辨荧光分析仪自动计算并显示,单位为微克/千克(μg/kg)。计算结果以重复性条件下获得的2次独立测定结果的算数平均值表示,保留至小数点后两位。
 
  重复性:
 
  在同一实验室,由同一操作人员,使用同一仪器,按照相同的测定方法,对同一被测试对象进行相互独立测试获得的两次独立测试结果的绝对差值大于其算术平均值20%的情况不超过5%。
 
  更多详情请见附件。
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