一、半自动酶标仪半自动酶标仪自检校准
1 外观
酶标仪上应有仪器名称,型号,编号,生产厂家,出厂日期和电源电压;各调节旋钮,按键和开关均能正常工作,外表面无明显机械损伤;显示文字应清楚完整。
2 酶标仪的稳定性(漂移)
选用492nm波长,在吸光度0.0A处,测定标称值为1.0A的光谱中性滤光片(测定操作按仪器说明进行),记录仪器示值或均值,10min后再次记录仪器示值或均值,前后两次测定值之差不应超过±0.005A。
3 吸光度测定的准确度
选用405,492和620 nm波长,以空气为参比,分别测定标称值为0.5和1.0A的光谱中性玻璃滤光片,用测试板代替酶标板,按仪器说明连续测定3次,按下式计算准确度:AA=1/3(A、+A。+A3)-A:(A:为标准值)。
4 吸光度测定的重复性
波长选择同(3),在酶标板*排加注空白溶液,第二排加入浓度为200rig/ml的重铬酸钾溶液,重复测定5次。记录每次测定的第二排吸光度值,取第二排任一孔吸光度值与各次对应孔吸光度值。按下式计算重复性:
5 酶标仪的线性
选用540nm波长,将标称值0.5,1.0A中性滤光片分别放入测试板样本位置中,以空气为参比,各重复测定3次;然后将以上两片中性滤光片叠加后置于测试板的同一孔位中,重复测定3次。线性误差:
式中A1为*片中性滤光片吸光度均值,A:为第二片中性滤光片吸光度均值,A1,2为两片中性滤光片叠加后的吸光度均值。
6 测定速度的检定
选用492nm波长,放人96孔酶标板进行测定,用秒表计测仪器打印出全部数据的时间。
酶标仪除了在选购时,应尽可能自检外,在使用中也应定期检定,以保证酶标仪测定的有效性。
附:200ttg/ml重铬酸钾溶液的配制
将重铬酸钾固体试剂放人称量瓶中(去盖)置于烘箱中,在105±5℃下烘2h后,置于干燥器内冷却30min,在分析天平上准确称取o.2829g,置于100ml烧杯中,用0.05mol/L稀硫酸溶解后,移入500ml容量瓶中,以少量0.05mol/L稀硫酸洗烧杯3次,洗液并入容量瓶中,用0.05mol/L稀硫酸稀释至刻度线,摇匀。
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