农药残留速测试剂说明书

产品名称：农药残留快速检测试剂

执行标准：GB/T 5009.199-2003

产品组成：酯酶、显色剂、底物与缓冲试剂。

【检测原理】

根据有机磷和氨基甲酸酯类农药能抑制酯酶的活性原理，如果蔬菜的提取液中不含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留或残留量低，酶的活性就不被抑制，实验中加入的底物就能被酶水解，水解产物与加入的显色剂反应产生颜色或水解产物本身有颜色，如果蔬菜的提取液里含有农药并残留量较高时，酶的活性被抑制，基质就不被水解，当加入显色剂时就不显色或颜色变化很小，用分光光度计测定吸光值随时间的变化瑞安开锁，计算出抑制率，就可以判断蔬菜中含有有机磷或氨基甲酸酯类农药残留量的情况。

对部份常见农药检测灵敏度：

A 有机磷类：

、、、、、、杀扑磷等（灵敏度0.5-5mg/kg）；

B 氨基甲酸酯类：

、、丙硫、丁硫、、仲丁威、、残杀威、、等（灵敏度0.2-2.5mg/kg）

一、试剂储存及包装规格

试剂配制前冷冻保存有效18个月，1-5℃冷藏12个月，常温2个月。

包装规格：500样/盒【5包，每包100样独立包装。每包包含：酶、显色剂、底物各1瓶。缓冲试剂10袋独立包装】

二、试剂配制

缓冲液：取一包缓冲剂用500mL蒸馏水搅拌溶解后常温备用。

底物：取一瓶加入10mL蒸馏水摇匀溶解，配制后1-5℃冷藏保存。

酶液：取一瓶加入10mL缓冲液摇匀溶解，配制后1-5℃冷藏保存。

显色剂：取一瓶加入10mL缓冲液摇匀溶解，配制后1-5℃冷藏保存。

三、样液制备

1、选取有代表性的果蔬除去泥土，叶菜类取叶片/瓜果取皮，剪成1cm见方大小。

2、叶菜类称取2g（瓜果类取4g），放入样品瓶后加10mL缓冲液，振荡2分钟。

3、倒出提取液澄清3-5分钟(浑浊或叶绿素多的样液则直接用滤纸过滤)。

四、检测步骤

1、仪器开机后进入待测界面预热。

2、取一支试管加2.5mL缓冲液做空白对照，其余试管则分别加2.5mL样液。

3、分别加入100μL酶、100μL显色剂，振荡后37℃恒温培养10分钟。（如果无条件加温培养也可在20℃以上的环境中放置15分钟）

4、再分别加入100μL底物振荡后倒入比色皿，立即放入仪器检测（对照放第1通道）。

5、仪器自动完成检测程序并打印出检测结果。

五、结果判定

抑制率＜50%时为合格；抑制率≥50%时农药残毒标。建议对结果为45-55%的进行双样复测。

六、提示说明

1、试剂应避免交叉污染，倒出后的试剂不可再倒回瓶内。

2、试剂使用前应摇匀，从冰箱取出的液体试剂应在室温放5分钟以上才使用。

3、检测室周围不得使用农药、灭蚊剂等药物，以免空气中药物分子影响试剂。

4、葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁中，含有对酶有影响的植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，可采取整株（体）浸提取样。

农药残留速测试剂

建立和实施农产品的市场准入制度是保障食品安全的一项重要工作，蔬菜中的农药残留快速检测是其中一个重要环节，卫生部食品卫生检测为此颁布了标准《蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量快速检测》(即GB/T5009.199-2003)。农残速测试剂是广州绿尚实验仪器有限公司为该标准方法制备的配套试剂，酶活性和对农药敏感性等指标均达到或过了标准的要求，可以在各种型号的农药残留检测仪(分光光度法)上使用，具有稳定性好、灵敏度高和使用方便等特点，适合各农药残留监测部门和检测站使用。

检测原理

在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对动物性神经介质酯酶正常功能有抑制作用，从而达到杀虫目的，其抑制率与农药的浓度呈正相关。正常条件下，酯酶(ChE)催化神经传导代谢产物类似物(碘化硫代乙酰ATCI或碘化硫代丁酰BTCI)水解，其水解产物与显色剂(二硫代二硝基苯甲酸DTNB)发生反应，产生黄色物质，用分光光度计或农残测试仪在412nm处测定吸光度的变化值(△A)，计算出抑制率可以判断出样品中是否有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药残留的存在。

酶活力:空白对照1分钟(3分钟)吸光度变化值(ΔΑ0)在0.15-0.3(0.3-0.8)之间。

使用方法

标准方法GB/T 5009.199-2003操作，或根据农残速测试剂的使用说明进行测试。

检测灵敏度

使用农药标准液对农残速测试剂的低检测限进行多次测试，通过了质量检验测试中心(广州)等检验机构的检测验证，结果符合标准，具体请参照检测报告。

农药残留速测试剂酶抑制率法对部分农药的检出限

农药中文名称	英文通用名称	检出限(mg/kg)
灭多威	Thiodicarb	0.8
	Omethoate	0.4
	Parathion	0.8
	isofenphos-methyl	2.0
	Phoxim	0.2
	Methamidophos	0.3
	Dichlorovos	0.1
丁硫	carbosulfan	0.2
	malathion	0.5
	Trichlophon	0.1
	Furadan	0.1
乐果	Dimethoate	0.8