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1、特异性:常用交叉反应率表示。含有与待测物相近结构部份的物质可能存在交叉反应,使测定结果升高,可能导致假阳性,所以交叉反应是评价其质量的关键指标。
2、灵敏度:有二层含义,1)为试剂检出被检物质的zui低量的能力;2)为试剂对大量样品中阳性检出的能力。
3、安全性:指试剂对操作者和环境安全无害无传染性。
小鼠碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)Elisa试剂盒 , 随着基因工程抗体技术的发展,在我国有些实验室开始了噬菌体抗体库的构建。用抗体库技术可直接制备人源抗体,例如利用被病原微生物感染的病人外周血细胞制备噬菌体抗体库,用特定抗原进行筛选,获得抗乙肝表面抗原、甲肝病毒的人源抗体。抗体库技术也被用于抗体性能改良,例如用链替换方法,以亲本抗体的一条链(轻链)与另一条链 ( 重链)的文库组合,构建抗体库,筛选高亲和力的克隆,再固定重链,用同样方法选择具有更高亲和力的轻链。一些特异性好、有应用前景的鼠抗体,利用抗原表位定向选择(EGS)方法,以鼠单抗可变区为模板,经噬菌体展示技术,通过抗原导向,筛选能够模拟鼠单抗可变区、结合相同抗原决定簇的人抗体,经这一方法获得人源抗体。国内也有实验室在计算机辅助设计下,将鼠抗体表面氨基酸残基“人源化”,主要将鼠 Fv段表面暴露的骨架区残基中与人Fv不同者改为人源性,使Fv的表面人源化,但仍保留其与抗原结合的特性。目前的问题是,有很多试剂型抗体或诊断用抗体进入市场,而治疗用抗体只有少数进入临床试验。分析主要原因,一是工程抗体表达量低。国内很多实验室,真核细胞中抗体表达量在1 毫克/升以下,很难用于生产。仅个别实验室在对载体进行改造后,抗体表达量达到40毫克/升。二是动物细胞规模化培养技术还不成熟,与国外相比存在很大差距。由于技术和经费等原因,我们动物细胞培养的规模zui大为50升,培养方式大多是采用微载体,悬浮批次和悬浮灌流尚属空白。在噬菌体抗体库的基础上,在近几年又发展了核糖体展示抗体库技术。核糖体展示抗体库技术代表了抗体工程的将来发展趋势。
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重力型去盐柱 1 column
蛋白及酶类稳定保护剂 10mL
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蛋白酶抑制剂混合物 100uL
1M DTT 100μL
β-巯基乙醇 500μL
蛋白透析Buffer 100mL
PMSF(100mM) 5 mL
TEMED 5 mL
SDS(10%) 100 mL
Western及IP细胞裂解液说明书 50mL
SDS-PAGE凝胶配制试剂盒 50块胶
5×SDS-PAGE蛋白上样缓冲液 1mL
10×电转移缓冲液 500mL
10×Tris-*蛋白电泳缓冲液 500mL
HRP显色液(DAB) 5mL
丽春红染色液 25mL
超敏可逆印迹膜染色试剂盒I 10次
WB一抗稀释液 100mL
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WB封闭液 100mL
2%封闭试剂 500ml
1%封闭试剂in1XPBS 500ml
1%封闭试剂in1XTBS 500ml
10×WB洗涤液 100mL
抗体清除液 500mL
PVDF膜(Millipore分装,0.45um) 15×15cm/张,5张/包装
NC膜(Millipore分装,0.45um) 15×15cm/张,5张/包装
显影定影试剂 各500mL
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